全酶,又称结合酶,除了蛋白质组分外,还含有对热稳定的小分子物质,前者称为酶蛋白,后者称为辅因子。酶蛋白和辅因子单独存在时,均无催化活力,只有二者结合成完整的分子时,才具有活力。此完整的酶分子称为全酶。对于大多数化学本质为蛋白质的酶来说,按照化学组成可分为单纯酶和结合酶两大类。全酶=酶蛋白+辅因子辅因子主要指金属离子、辅酶和辅基。具有催化活性的全酶,包括所有酶蛋白、必需的亚基、辅基和其它的辅助因子。
测定法:
酶蛋白浓度测定的方法:酶浓度严格来说是指酶分子的质量浓度,常以酶蛋白浓度来表示。人体体液中的酶有几百种,除LPS、LCAT、ChE、铜氧化酶(CER)外,大多数酶的含量在μg/L水平甚至更低。因此,酶活性浓度的测定是主要测定方法。20世纪70年代以后,随着新技术特别是免疫学技术的发展,酶的定量分析技术中出现了许多利用酶蛋白的抗原性,通过抗原抗体反应直接测定酶蛋白质量的新方法。国内外曾使用电泳法、柱层析法、免疫化学法等测定酶浓度,其中以免疫化学法应用较广。免疫化学法是利用酶蛋白的抗原性,制备特异性抗体后用免疫学方法测定酶浓度。用于酶浓度测定的免疫化学方法有:免疫抑制法、免疫沉淀法、放射免疫测定(RIA)、化学发光免疫测定(CLIA)、酶免疫测定(EIA)、荧光酶免疫测定(FEIA)等。其中,前两种方法可用于酶活性浓度测定,其他方法则用于酶蛋白浓度测定。
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